Léa HUILIO Régulations de CIRBP en réponse aux stress liés à l’infection bactérienne
IBENS - Équipe Dynamique du dialogue bactérie-cellule
14h
La soutenance de thèse de Léa Huilio (sous la direction d’Alice Lebreton, IBENS) aura lieu dans la salle Jean Jaurès, 29 rue d’Ulm 75005 Paris
Résumé :
Au cours de l’infection de cellules humaines par la bactérie pathogène alimentaire Listeria monocytogenes, l’expression des gènes de l’hôte est remaniée par différents mécanismes, notamment par épissage alternatif. Ce manuscrit porte sur l’étude d’un facteur de réponse au stress régulé par ce mécanisme, la protéine de liaison à l’ARN CIRBP (Cold-inducible RNA Binding Protein, Protéine de liaison à l’ARN induite par le froid), dont l’expression bascule vers un isoforme alternatif au cours de l’infection sous l’effet de la listériolysine O, une toxine bactérienne qui forme des pores dans la membrane plasmique et qui affecte l’activité de la kinase CLK1, régulatrice des facteurs d’épissage SRSF. Cette bascule d’épissage conduit à un déséquilibre entre deux isoformes protéiques de CIRBP, CIRBP-201 et CIRBP-210, qui ne diffèrent que de cinq acides aminés en région C-terminale. L’activité cytolytique de la LLO conduit par ailleurs au relargage de CIRBP dans le milieu extracellulaire. Afin de déterminer si les deux isoformes protéiques de CIRBP se comportent différemment au cours de l’infection, j’ai comparé leur localisation subcellulaire, leur capacité de sécrétion, leur devenir au sein des granules de stress. Aucune différence marquée n’a été observée entre les deux isoformes. Ces résultats suggèrent que la bascule d’épissage observée au cours de l’infection viserait principalement à produire un transcrit instable, réduisant ainsi la quantité totale de CIRBP produite, plutôt qu’à générer deux protéines aux propriétés distinctes. Sur le plan fonctionnel, mes travaux montrent que CIRBP favorise l’infection des cellules épithéliales par Listeria monocytogenes, un effet généralisable à cinq autres espèces bactériennes. Afin de déterminer à quelle étape du cycle infectieux CIRBP agit, j’ai évalué son impact sur l’adhésion des bactéries à la surface cellulaire, leur internalisation, leur croissance intracellulaire, ainsi que leur échappement à l’autophagie. Cette étude a révélé que c’est principalement l’adhésion bactérienne qui est modulée par CIRBP, les autres étapes du cycle infectieux n’étant pas affectées. Cette fonction pro-adhésive repose sur la forme extracellulaire de la protéine plutôt que sur son activité intracellulaire de protéine de liaison à l’ARN, et se révèle indépendante de l’isoforme exprimé. Les récepteurs impliqués dans cette interaction ainsi que les mécanismes moléculaires sous-jacents restent à identifier. Mes travaux identifient ainsi CIRBP comme un nouvel acteur pro-bactérien de l’infection par Listeria monocytogenes, agissant spécifiquement comme modulateur de l’étape d’adhésion par voie paracrine.